Wat dient gewoonlijk als een DNA-kloneringsvector?
Wat dient gewoonlijk als een DNA-kloneringsvector?

Video: Wat dient gewoonlijk als een DNA-kloneringsvector?

Video: Wat dient gewoonlijk als een DNA-kloneringsvector?
Video: Plasmids | Cloning vectors: Plasmids | Why do we use plasmids in RDT? | features of a plasmid 2024, December
Anonim

Er zijn veel soorten vectoren klonen , maar het meest algemeen gebruikte zijn genetisch gemanipuleerde plasmiden. Klonen wordt over het algemeen eerst uitgevoerd met Escherichia coli, en vectoren klonen in E. coli omvatten plasmiden, bacteriofagen (zoals faag λ), cosmiden en bacteriële kunstmatige chromosomen (BAC's).

Ook gevraagd, wat is een vector in DNA-klonering?

in moleculair klonen , een vector is een DNA molecuul dat wordt gebruikt als een drager om vreemd genetisch materiaal kunstmatig naar een andere cel te brengen, waar het kan worden gerepliceerd en/of tot expressie kan worden gebracht (bijv. plasmide, cosmide, Lambda-fagen). EEN vector met buitenlandse DNA wordt recombinant genoemd DNA.

Weet ook, hoe kloon je een vector? Experimentele procedure

  1. Voer PCR uit en zuiver het PCR-product: Voer PCR uit om uw insert-DNA te amplificeren.
  2. Verteer je DNA:
  3. Isoleer uw insert en vector door gelzuivering:
  4. Ligeer uw insert in uw vector:
  5. transformatie:
  6. Isoleer het afgewerkte plasmide:
  7. Controleer uw plasmide door te sequensen:

Hoe werkt pBR322 in dit opzicht als een kloneringsvector?

pBR322 Plasmide pBR322 was een van de eerste plasmiden die werden gebruikt voor klonen . Het bevat genen voor de resistentie tegen tetracycline en ampicilline. Insertie van het DNA op specifieke restrictieplaatsen kan het gen voor tetracycline inactiveren (een effect dat bekend staat als een insertie-inactivatie) of ampicillineresistentie.

Met welke techniek kunnen heel snel veel kopieën van een bepaald stukje DNA worden gemaakt?

Polymerasekettingreactie

Aanbevolen: