Is Cre lox omkeerbaar?
Is Cre lox omkeerbaar?

Video: Is Cre lox omkeerbaar?

Video: Is Cre lox omkeerbaar?
Video: Conditional gene expression using the Cre Lox FLEx vector switch! 2024, Mei
Anonim

Alle recombinatiegebeurtenissen gemedieerd door FLP of Cre zijn omkeerbaar . Terwijl de excisie van een stukje DNA geflankeerd door loxP /FRT-sites hebben de voorkeur boven herintroductie, inversie en herinversie gebeuren met dezelfde waarschijnlijkheid. De loxP en FRT-doelsites zijn ontworpen om dit herinversieprobleem te voorkomen.

Hoe werkt CRE LOX dan?

Cre - Lox recombinatie omvat het richten op een specifieke sequentie van DNA en het splitsen met behulp van een enzym genaamd Cre recombinase . De Cre eiwit is een plaatsspecifiek DNA recombinase die de recombinatie van DNA tussen specifieke plaatsen in een DNA-molecuul kan katalyseren.

Bovendien, wat doet Cre-recombinase? Cre-recombinase is een tyrosine recombinase enzym afgeleid van de P1-bacteriofaag. Het enzym (38kDa) is een lid van de integrasefamilie van plaatsspecifiek recombinase en het is waarvan bekend is dat het de plaatsspecifieke recombinatie-gebeurtenis tussen twee DNA-herkenningsplaatsen (LoxP-plaatsen) katalyseert.

Wat dit betreft, hoe induceert tamoxifen Cre?

Tamoxifen administratie induceert Cre recombinase-expressie onder de α-MHC-promoter, vergelijkbaar met die in de bovenstaande muizen, wat hartspierspecifieke Dicer-deletie op een specifiek tijdstip mogelijk maakt.

Wat zijn loxP-sites?

LoxP-sites zijn directionele sequenties van 34 bp die bestaan uit twee herkenningspunten van 13 bp sites gescheiden door een 8 bp spacergebied. De sequenties komen van nature niet voor in andere bekende genomen dan de P1-bacteriofaag, en zijn lang genoeg dat het onwaarschijnlijk is dat ze bij toeval voorkomen.