Hoe wordt DNA uit plantenweefsel geëxtraheerd?
Hoe wordt DNA uit plantenweefsel geëxtraheerd?

Video: Hoe wordt DNA uit plantenweefsel geëxtraheerd?

Video: Hoe wordt DNA uit plantenweefsel geëxtraheerd?
Video: Isolation of Genomic DNA from Plant Tissue 2024, Maart
Anonim

De celwanden moeten worden afgebroken (of verteerd) om de celbestanddelen vrij te maken. Dit wordt meestal gedaan door de zakdoek in droogijs of vloeibare stikstof met een vijzel en een stamper of een voedselmolen. De celmembranen moeten worden verbroken, zodat de DNA wordt losgelaten in de extractie buffer.

Evenzo kan men zich afvragen, wat zijn de methoden van DNA-extractie?

Enkele van de meest voorkomende DNA-extractiemethoden inclusief biologisch extractie , Chelex extractie en vaste fase extractie . Deze methoden consequent geïsoleerd opleveren DNA , maar ze verschillen in zowel de kwaliteit als de kwantiteit van DNA opgeleverd.

Weet ook, hoe werkt CTAB DNA-extractie? CTAB werd enige tijd geleden opgericht als het beste wasmiddel om te gebruiken tijdens de extractie / isolatie van sterk gepolymeriseerde DNA uit plantaardig materiaal. Dit detergens lost tegelijkertijd de plantencelwand en lipidemembranen van interne organellen op en denatureert eiwitten (enzymen).

Hoe maak je, behalve hierboven, een DNA-extractiebuffer?

DNA-extractiebuffer : Bevat 0,1 M EDTA @ pH 8, 1% SDS en 200 µg/mL proteïnase K. Maken een voorraad van 50 ml 0,1 M EDTA-1% SDS door 10 ml EDTA pH8, 5 ml 10% SDS en 35 ml MilliQ-water te combineren voor een totaal volume van 50 ml. Meng goed door te vortexen.

Wat zijn de 4 basisstappen voor DNA-extractie?

De DNA-extractieproces bevrijdt DNA uit de cel en scheidt het vervolgens van celvloeistof en eiwitten, zodat je pure overhoudt DNA . De boom basisstappen van DNA-extractie zijn 1) lysis, 2) precipitatie en 3) zuivering.

De basisprincipes van DNA-extractie

  1. Stap 1: Lysis.
  2. Stap 2: Neerslag.
  3. Stap 3: Zuivering.

Aanbevolen: