Waarom wordt nitrocellulosemembraan gebruikt bij Southern-blotting?
Waarom wordt nitrocellulosemembraan gebruikt bij Southern-blotting?

Video: Waarom wordt nitrocellulosemembraan gebruikt bij Southern-blotting?

Video: Waarom wordt nitrocellulosemembraan gebruikt bij Southern-blotting?
Video: Quick Tips: Considerations for Selecting Nitrocellulose or PVDF to use for Western Blots 2024, November
Anonim

In het originele protocol nitrocellulose membraan ben geweest gebruikt voor de blotting in het geval van zuidelijke vlek maar in de afgelopen tijd nylon membranen zijn uitgevoerd voor de blotting proces vanwege hun vermogen om meer hoeveelheid DNA efficiënt te binden, waardoor de zuidelijke vlek uit te voeren met minder hoeveelheid

Dienovereenkomstig, waarom wordt nitrocellulosemembraan gebruikt bij blotting?

Nitrocellulosemembranen zijn een populaire matrix gebruikt in eiwit blotting vanwege hun hoge eiwitbindingsaffiniteit, compatibiliteit met een verscheidenheid aan detectiemethoden (chemiluminescentie, chromogeen en fluorescentie) en het vermogen om eiwitten, glycoproteïnen of nucleïnezuren te immobiliseren.

En waarom wordt DNA overgebracht naar een nylonmembraan? Door 0,4 M NaOH te gebruiken als de overdracht oplosmiddel na een korte voorbehandeling van de gel in zuur, DNA wordt gedepurineerd tijdens overdracht . Blootstelling van DNA aan ultraviolet licht, hetzij in de gel of volgende overdracht tot nylon membraan , vermindert het vermogen om te hybridiseren.

Bovendien, wat is het doel van Southern blotting?

EEN zuidelijke vlek is een methode die in de moleculaire biologie wordt gebruikt voor de detectie van een specifieke DNA-sequentie in DNA-monsters. zuidelijke blotting combineert overdracht van door elektroforese gescheiden DNA-fragmenten naar een filtermembraan en daaropvolgende fragmentdetectie door probehybridisatie.

Hoe helpt Southern blotting bij forensische studies?

EEN zuidelijke vlek , genoemd naar zijn uitvinder Edwin Zuidelijk , is een methode die wordt gebruikt om te controleren op de aanwezigheid van een specifieke DNA-sequentie in een DNA-monster. Zodra het DNA van een individu is verteerd met een specifiek restrictie-enzym, worden de resulterende fragmenten geanalyseerd door zuidelijke vlek analyse.

Aanbevolen: